Kwa nini glukosi hutumiwa katika kutengwa kwa DNA ya plasmid?
Kwa nini glukosi hutumiwa katika kutengwa kwa DNA ya plasmid?

Video: Kwa nini glukosi hutumiwa katika kutengwa kwa DNA ya plasmid?

Video: Kwa nini glukosi hutumiwa katika kutengwa kwa DNA ya plasmid?
Video: EMYAKA 22 KU ALIMANDA: Alex Twinomugisha kyaddaaki kkooti emuyimbudde 2024, Novemba
Anonim

Madhumuni ya hatua hii ni kuongeza kiasi cha kuanzia cha seli ili zaidi DNA ya plasmid inaweza kutengwa kwa maandalizi. Glukosi huongezwa ili kuongeza shinikizo la osmotic nje ya seli. Tris ni wakala wa kuakibisha kutumika kudumisha pH ya mara kwa mara (= 8.0).

Vivyo hivyo, ni nini jukumu la sukari katika uchimbaji wa DNA?

50mM (milimolar) sukari ya sukari huongezwa kwa GTE buffer ili kudumisha osmolarity ambapo mkusanyiko wa solute nje ya seli uko karibu na ule wa ndani ya seli. Hii inazuia lysis ya mapema ya seli, ambayo inaweza kusababisha kupungua DNA mavuno kutokana na kujumlisha na kuharibika.

Zaidi ya hayo, kwa nini NaOH inatumika katika uchimbaji wa DNA? Katika Kutengwa kwa DNA au uchimbaji , NaOH ( Hidroksidi ya sodiamu ni kutumika kama buffer ya alkali ya lysis. Ni kimsingi husaidia katika kufuta utando wa seli ili vipengele vya ndani vya seli ikiwa ni pamoja na DNA njoo nje.

Kwa hivyo, ni nini madhumuni ya kutengwa kwa plasmid ya DNA?

Kutengwa kwa Plasmid . The kujitenga ya DNA ya plasmid kutoka kwa bakteria ni mbinu muhimu katika biolojia ya molekuli na ni hatua muhimu katika taratibu nyingi kama vile cloning, DNA mpangilio, uhamishaji, na tiba ya jeni. Udanganyifu huu unahitaji kujitenga ya usafi wa hali ya juu DNA ya plasmid.

Je, unatengaje DNA ya plasmid kutoka kwa E coli?

The kujitenga ya DNA ya plasmid kutoka kwa E . coli kutumia lysis ya alkali ni njia iliyoanzishwa vizuri. E . coli na plasmid hupandwa katika vyombo vya habari na viuavijasumu hadi kwenye msongamano mkubwa wa seli, huvunwa, na kisha kuwekwa kwa suluhu ya SDS/NaOH.

Ilipendekeza: