Orodha ya maudhui:

Je, unachaguaje clones?
Je, unachaguaje clones?

Video: Je, unachaguaje clones?

Video: Je, unachaguaje clones?
Video: Wordle Clone in JavaScript! 2024, Novemba
Anonim

Lini kuchagua a clone , hakikisha kwamba mizizi ni yenye nguvu, nyeupe na inajitokeza kwa hamu kutoka kwa njia ya kukua. Ikiwa mizizi ni kahawia na imesinyaa, au vinginevyo inaonekana kuwa haina kazi, irudishe na utafute iliyo bora zaidi.

Kando na hilo, unawezaje kuiga seli moja?

  1. Hesabu seli ili kuweka ~ seli 16, 000 kwenye kisima cha kwanza (A1) cha sahani yenye visima 96 iliyo na 200 µL za kati.
  2. Ondoa 100 µL kutoka kwa A1 iliyo na seli na uchanganye na B1, ukipiga bomba juu na chini mara 3 ili uchanganye vizuri kabla ya kuondoa 100 µL na kuchanganya na C1, nk.

Pia, unawezaje kuchagua koloni ya seli ya mamalia? Weka sahani chini ya darubini ili kuchagua afya isiyotofautishwa makoloni . Chagua makoloni kwa kutumia pipette ya P-20 iliyowekwa kwa 10ul. Kwa uangalifu chagua a koloni bila kuvunja koloni kwenye single seli , na uhamishe kwenye sahani yenye visima 96 yenye trypsin. Pipette juu na chini mara kadhaa kutawanya koloni.

Sambamba, unatumiaje silinda ya clone?

Kutumia tasa kati forceps, pick up a cloning silinda . Bonyeza kwa upole chini ya gorofa ya silinda ndani ya grisi laini ya silicone na uondoe kwa mwendo wa wima wa ghafla. Ikifanywa vizuri, hii itatoa usambazaji sawa wa grisi chini ya silinda . Weka silinda juu ya koloni.

Je, unachagua vipi makoloni kwa mistari thabiti ya seli?

Itifaki ya kutengeneza mistari thabiti ya seli inahitaji hatua kadhaa kama inavyoonyeshwa hapa chini:

  1. Tengeneza curve ya kuua ili kubaini uteuzi bora wa mkusanyiko wa antibiotiki.
  2. Hamisha seli kwa uundaji unaohitajika wa plasmid
  3. Chagua na upanue makoloni thabiti ya polyclonal.
  4. Tambua clones moja kwa dilution na upanuzi mdogo.

Ilipendekeza: