Video: Mpangilio wa DNA ya Sanger hufanyaje kazi?
2024 Mwandishi: Stanley Ellington | [email protected]. Mwisho uliobadilishwa: 2023-12-16 00:23
Utaratibu wa hatari matokeo katika uundaji wa bidhaa za ugani za urefu tofauti zilizokomeshwa na dieoxynucleotides mwishoni mwa 3'. Bidhaa za ugani basi hutenganishwa na Capillary Electrophoresis au CE. Molekuli hudungwa na mkondo wa umeme kwenye kapilari ndefu ya glasi iliyojazwa na polima ya gel.
Kwa njia hii, ni nini njia ya Sanger ya upangaji wa DNA?
Utaratibu wa hatari , pia inajulikana kama kukomesha mnyororo njia , ni mbinu ya Mpangilio wa DNA kulingana na kuingizwa kwa kuchagua kwa dideoxynucleotides (ddNTPs) za kumaliza mnyororo DNA polymerase wakati wa in vitro DNA urudufishaji. Iliundwa na Frederick Sanger na wenzake mnamo 1977.
Pia, je! Upangaji wa kukomesha mnyororo hufanya kazije? Sanger DNA mpangilio pia inajulikana kama mnyororo - kusitisha njia ya mpangilio . ddNTPs husababisha kusitisha ya mkanda wa DNA kwa sababu ddNTP hazina kikundi cha 3'-OH kinachohitajika kwa uundaji wa dhamana ya phosphodiester kati ya nyukleotidi. Bila dhamana hii, mnyororo ya nucleotidi inayoundwa ni kuachishwa.
Kwa hivyo tu, kwa nini tunafanya mpangilio wa Sanger?
Sanger mpangilio ni a njia ya Utaratibu wa DNA kulingana na uingizaji wa kuchagua wa dideoxynucleotides inayomaliza mnyororo na DNA polymerase wakati wa in vitro DNA kuiga. Bado ina faida juu ya kusoma kwa kifupi mpangilio teknolojia (kama Illumina) kwamba unaweza kuzalisha Mlolongo wa DNA inasoma ya> nyukleotidi 500.
Je! Mpangilio wa Sanger ni sahihi?
Utaratibu wa hatari na 99.99% usahihi ni "kiwango cha dhahabu" kwa utafiti wa kliniki mpangilio . Hata hivyo, teknolojia mpya zaidi za NGS pia zinazidi kuwa za kawaida katika maabara za utafiti wa kimatibabu kutokana na uwezo wao wa juu wa matokeo na gharama ndogo kwa kila sampuli.
Ilipendekeza:
Je, kazi ya DdNTP katika mpangilio wa DNA ni nini?
DdNTP inajumuisha ddATP, ddTTP, ddCTP na ddGTP. DdNTP ni muhimu katika uchanganuzi wa muundo wa DNA kwani inazuia upolimishaji wa uzi wa DNA wakati wa uigaji wa DNA, na kutoa urefu tofauti wa nyuzi za DNA zilizonakiliwa kutoka kwa uzi wa kiolezo
Je, eneo la kazi la ulegevu hufanyaje kazi?
Nafasi ya kazi ya Slack ni kitovu cha pamoja kinachoundwa na vituo ambapo washiriki wa timu wanaweza kuwasiliana na kufanya kazi pamoja. Unapojiunga na nafasi ya kazi, utahitaji kufungua akaunti ya aSlack ukitumia anwani yako ya barua pepe. Ikiwa unapanga kujiunga na zaidi ya nafasi moja ya kazi, utahitaji kuunda akaunti tofauti kwa kila moja
Kwa nini tunatumia mpangilio wa Sanger?
Mfuatano wa Sanger ni mbinu mwafaka ya tafiti za uchunguzi lahaja wakati jumla ya idadi ya sampuli ni ndogo. Kwa masomo ya uchunguzi lahaja ambapo nambari ya sampuli iko juu, mpangilio wa amplicon na NGS ni mzuri zaidi na wa gharama nafuu
Je, mpangilio wa Sanger ni sahihi kadiri gani?
Mfuatano wa Sanger wenye usahihi wa 99.99% ndio "kiwango cha dhahabu" cha mfuatano wa utafiti wa kimatibabu. Walakini, teknolojia mpya za NGS pia zinazidi kuwa za kawaida katika maabara za utafiti wa kimatibabu kwa sababu ya uwezo wao wa juu wa matokeo na gharama ya chini kwa kila sampuli
Kuna tofauti gani kati ya mpangilio wa Sanger na mpangilio wa kizazi kijacho?
Teknolojia za mfuatano wa kizazi kijacho (NGS) zinafanana. Tofauti muhimu kati ya Sangersequencing na NGS ni mpangilio wa sauti. Ingawa njia ya theSanger hufuatana tu kipande kimoja cha DNA kwa wakati, NGS inawiana sana, ikipanga mamilioni ya vipande kwa wakati mmoja kwa kila mkimbio